24小时热门版块排行榜    

查看: 1458  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linxia2009

金虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE 180kD跑胶

想要的蛋白在180kD,用5%浓缩胶,8%分离胶(也用过7%),跑浓缩胶80v,分离胶120V。染色后,170kD以下的条带都很清晰,170kD以上到点样孔的位置没有出现明显的条带,是一团蓝色,像没跑开的样子。后来我又做了一遍,故意多跑了一会儿,聚集成团的蓝色被拉长了,但是不是条带,是锯齿状的杂乱的,甚至有竖着的。
这个实验是前段时间做的,今天图片没找到,找到后补上。
请问这是什么问题,是样品没有制好,还是跑胶电泳条件不对?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流经验! 2013-11-18 23:14:37
linxia2009: 金币+3 2013-11-19 10:03:13
用6%的分离胶试一试,我的膜蛋白都在170kD以上,将溴酚蓝走出去,marker的70kd左右在胶的最下面,我最大的340kd的蛋白可以在胶的最上面出现。浓缩胶是5%的,都是按分子克隆第二版配的液体,其他的行胶条件,煮样条件等等和行小蛋白没区别。
5楼2013-11-18 21:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-08 08:24:07
linxia2009: 金币+3 2013-11-10 18:54:15
延长变性时间,增加变性时SDS浓度。如果是膜蛋白,最好不要煮。
2楼2013-11-08 01:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


linxia2009: 金币+1 2013-11-18 20:48:40
难道是传说中的鬼带
变性不够充分或者样品溶解性不好
3楼2013-11-11 15:47:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
linxia2009: 金币+3 2013-11-18 20:48:46
gyesang: 金币+5, 鼓励交流! 2013-11-18 23:14:17
1、增加样品煮样时间
2、建议使用4%的浓缩胶,8%的分离胶试试
3、建议蛋白条带进入分离胶后,用180V的电压跑
4、配胶时,延长凝固时间
4楼2013-11-18 16:30:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:24 by jCd0dEvKHShX
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:13 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:02 by jCd0dEvKHShX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见