24小时热门版块排行榜    

查看: 1281  |  回复: 4

linxia2009

金虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE 180kD跑胶

想要的蛋白在180kD,用5%浓缩胶,8%分离胶(也用过7%),跑浓缩胶80v,分离胶120V。染色后,170kD以下的条带都很清晰,170kD以上到点样孔的位置没有出现明显的条带,是一团蓝色,像没跑开的样子。后来我又做了一遍,故意多跑了一会儿,聚集成团的蓝色被拉长了,但是不是条带,是锯齿状的杂乱的,甚至有竖着的。
这个实验是前段时间做的,今天图片没找到,找到后补上。
请问这是什么问题,是样品没有制好,还是跑胶电泳条件不对?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-08 08:24:07
linxia2009: 金币+3 2013-11-10 18:54:15
延长变性时间,增加变性时SDS浓度。如果是膜蛋白,最好不要煮。
2楼2013-11-08 01:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


linxia2009: 金币+1 2013-11-18 20:48:40
难道是传说中的鬼带
变性不够充分或者样品溶解性不好
3楼2013-11-11 15:47:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
linxia2009: 金币+3 2013-11-18 20:48:46
gyesang: 金币+5, 鼓励交流! 2013-11-18 23:14:17
1、增加样品煮样时间
2、建议使用4%的浓缩胶,8%的分离胶试试
3、建议蛋白条带进入分离胶后,用180V的电压跑
4、配胶时,延长凝固时间
4楼2013-11-18 16:30:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流经验! 2013-11-18 23:14:37
linxia2009: 金币+3 2013-11-19 10:03:13
用6%的分离胶试一试,我的膜蛋白都在170kD以上,将溴酚蓝走出去,marker的70kd左右在胶的最下面,我最大的340kd的蛋白可以在胶的最上面出现。浓缩胶是5%的,都是按分子克隆第二版配的液体,其他的行胶条件,煮样条件等等和行小蛋白没区别。
5楼2013-11-18 21:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 linxia2009 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 086003食品工程求调剂 +5 淼淼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 20:53 by lailaisimei
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:46 by zhouxuan..
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 考研化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 8/400 2026-03-23 18:39 by macy2011
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见