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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE 180kD跑胶
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linxia2009

金虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE 180kD跑胶

想要的蛋白在180kD，用5%浓缩胶，8%分离胶（也用过7%），跑浓缩胶80v，分离胶120V。染色后，170kD以下的条带都很清晰，170kD以上到点样孔的位置没有出现明显的条带，是一团蓝色，像没跑开的样子。后来我又做了一遍，故意多跑了一会儿，聚集成团的蓝色被拉长了，但是不是条带，是锯齿状的杂乱的，甚至有竖着的。
这个实验是前段时间做的，今天图片没找到，找到后补上。
请问这是什么问题，是样品没有制好，还是跑胶电泳条件不对？
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1楼 2013-11-07 22:11:47
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haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
linxia2009: 金币+3 2013-11-18 20:48:46
gyesang: 金币+5, 鼓励交流！ 2013-11-18 23:14:17
1、增加样品煮样时间
2、建议使用4%的浓缩胶，8%的分离胶试试
3、建议蛋白条带进入分离胶后，用180V的电压跑
4、配胶时，延长凝固时间
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4楼2013-11-18 16:30:00
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