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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定量PCR融解曲线问题
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zzl2516

金虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR融解曲线问题

定量PCR条件完全一样 融解曲线不一致，差别很大，一开始是摸条件，我感觉差不多了之后就正式跑了一下样品，跑出来的结果和摸条件时跑出来差别很大
定量PCR融解曲线问题
定量PCR融解曲线问题-1
这两张是摸条件时的图
定量PCR融解曲线问题-2
定量PCR融解曲线问题-3
这是跑样品时的图
为什么跑样品时的融解曲线会有杂峰呢，明明条件和反应体系都是完全相同的
有可能是我摸条件的时候加错东西了么。。。。。但是当时加的量有没有加错完全记不清楚了。。。
这种情况应该怎么破呢。。。。
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1楼 2013-11-07 20:38:54
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
反应用的buffer是买的吗？要不先跑胶看有没有杂带
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5楼2013-11-10 15:11:02
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第二张图看起来好像出现杂带了吧  建议跑电泳看一下  可能是模板坏掉了 或者别的什么东西坏掉了
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-08 21:58:47
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