24小时热门版块排行榜    

查看: 1917  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

pycraze

木虫 (小有名气)

[求助] 怎么预期酶切产物的大小?

看了很多基因克隆和表达的论文,其中很多论文都提到“PCR产物片段大小与预期结果相符”或者“表达的蛋白与预想的一致”,,,请问怎么预知PCR产物片段和所要表达的蛋白的大小??
请各位虫友们指教指教,不胜感激!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑盖儿

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pycraze at 2013-10-08 18:05:34
那如果是未知基因呢,那不就查不到了??那又怎么确定基因的大小了?...

未知基因也是一样要PCR,只不过用的引物不一样,PCR以后跑个琼脂糖凝胶电泳,对照一下Marker就可以大体判断一下大小了,如果要精确判断的话,还需要连接到质粒上,拿去测个序就知道了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

我给不了你宝马香车,锦衣玉食,但我会用一辈子去疼你,爱你,保护你
6楼2013-10-09 09:40:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-08 20:18:06
既然是做蛋白的重组表达,肯定是知道目的基因和目的蛋白的序列的啊,所以PCR产物也就是目的基因片段的大小就是已知的啊~~蛋白的大小如果不知道,根据氨基酸序列计算一下就可以啦

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-10-08 10:54:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-08 20:18:12
你在做PCR之前,要先到NCBI上查找基因序列,那个时候就能确定基因的大小。在PCR以后要跑琼脂糖凝胶电泳,会点Marker,将PCR片段对照Marker就知道大小是不是符合要求了。
我给不了你宝马香车,锦衣玉食,但我会用一辈子去疼你,爱你,保护你
3楼2013-10-08 12:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pycraze

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-08 10:54:49
既然是做蛋白的重组表达,肯定是知道目的基因和目的蛋白的序列的啊,所以PCR产物也就是目的基因片段的大小就是已知的啊~~蛋白的大小如果不知道,根据氨基酸序列计算一下就可以啦

如果是个新基因或新蛋白呢?那就不知道他的序列啊,,,那就没办法预知了吧?
还想问哈,如果是几丁质酶,那所有同类型细胞(真核或原核)里面的编码几丁质酶的序列都是一样的吗?谢谢~
4楼2013-10-08 18:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见