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pycraze

木虫 (小有名气)

[求助] 怎么预期酶切产物的大小?

看了很多基因克隆和表达的论文,其中很多论文都提到“PCR产物片段大小与预期结果相符”或者“表达的蛋白与预想的一致”,,,请问怎么预知PCR产物片段和所要表达的蛋白的大小??
请各位虫友们指教指教,不胜感激!!!
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-08 20:18:06
既然是做蛋白的重组表达,肯定是知道目的基因和目的蛋白的序列的啊,所以PCR产物也就是目的基因片段的大小就是已知的啊~~蛋白的大小如果不知道,根据氨基酸序列计算一下就可以啦

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岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-10-08 10:54:49
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bleach060452

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by pycraze at 2013-10-08 18:03:48
如果是个新基因或新蛋白呢?那就不知道他的序列啊,,,那就没办法预知了吧?
还想问哈,如果是几丁质酶,那所有同类型细胞(真核或原核)里面的编码几丁质酶的序列都是一样的吗?谢谢~...

如果是未知基因或蛋白,当然无从说起“与预期大小一致”,但是也就不可能做重组表达了。

对于同一种蛋白在不同表达系统中的编码当然不会都一样了,首先秘密子的偏好性不同;而且就是同一种属内也会有不同的,基因多态性么。
岂能尽如人意,但求无愧我心
9楼2013-10-09 13:26:36
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