24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1949  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liulugang

木虫 (小有名气)

[求助] 求问44bp线性片段PCR,设计引物时需要注意什么?

求问,44bp长的线性片段PCR扩增,设计引物时需要特别注意什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-27 21:22:47
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-28 02:03:15
引用回帖:
6楼: Originally posted by liulugang at 2013-09-27 16:27:29
片段是合成的,浓度太低,所以想PCR一下...

引物长度就得20bp左右,实际只增加了1倍的DNA量(引物的量和合成的双链等摩尔)或4倍(等OD值)这是理论产量,实际达不到。为了不到4倍的产量冒不纯的风险,犯不上吧。
7楼2013-09-27 19:49:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩 2013-09-26 00:05:48
P什么,不直接合成引物然后退火?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2013-09-25 20:36:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liulugang: 金币+1, 有帮助 2013-09-26 16:25:07
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-27 15:58:28
这么短的还真没做过,最短的做过60bp的,相对还是比较好扩的。另外两个引物接到一块儿都能扩出来,44bp问题应该不会很大,相对于长片段应该容易一些
3楼2013-09-26 16:12:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulugang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-09-25 20:36:24
P什么,不直接合成引物然后退火?

组成型启动子
4楼2013-09-26 16:24:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂,对材料和化学方向也感兴趣 +11 无情的小羊 2026-04-09 12/600 2026-04-12 17:41 by 686666
[考研] 297求调剂 +17 ORCHID1 2026-04-10 18/900 2026-04-12 09:59 by zhouwenxian
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 080500求调剂 +17 黄宇博 2026-04-06 17/850 2026-04-11 08:36 by zhq0425
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 314求调剂 +23 wakeluofu 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 15:31 by MOF_Catal
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考研] 复试调剂,一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +15 熊二想上岸 2026-04-06 15/750 2026-04-08 04:53 by 无际的草原
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-06 4/200 2026-04-07 20:06 by shanqishi
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
信息提示
请填处理意见