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liulugang

木虫 (小有名气)

[求助] 求问44bp线性片段PCR,设计引物时需要注意什么?

求问,44bp长的线性片段PCR扩增,设计引物时需要特别注意什么?
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liulugang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-27 15:44:53
直接合成吧,太短了,引物二聚体和产物无法分开。就是一对44bp的引物,直接退火

片段是合成的,浓度太低,所以想PCR一下
6楼2013-09-27 16:27:29
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩 2013-09-26 00:05:48
P什么,不直接合成引物然后退火?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2013-09-25 20:36:24
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子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liulugang: 金币+1, 有帮助 2013-09-26 16:25:07
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-27 15:58:28
这么短的还真没做过,最短的做过60bp的,相对还是比较好扩的。另外两个引物接到一块儿都能扩出来,44bp问题应该不会很大,相对于长片段应该容易一些
3楼2013-09-26 16:12:29
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liulugang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-09-25 20:36:24
P什么,不直接合成引物然后退火?

组成型启动子
4楼2013-09-26 16:24:35
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