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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌基因敲除

大家好,我正准备做基因敲除,可是对于敲出的知识还不懂,是个门外汉,敲除都需要做哪些准备,我想用抗性基因做标记,怎么设计打靶基因?还有引物?
  请好心虫友帮助,谢谢。
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-13 22:20:36
One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coli K-12 using PCR products

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10829079

Recombineering: a homologous recombination-based method of genetic engineering
http://www.nature.com/nprot/jour ... nprot.2008.227.html

第一个是pkd46  第二个是psim   第二个效率高点

marker 如果要loopout,可以用flp(设计序列)+pcp20(质粒)
2楼2013-09-13 21:20:52
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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-09-13 21:20:52
One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coli K-12 using PCR products

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10829079

Recombineering: a homologous recombination-based method of gen ...

能不能通俗点,我还不怎么了解具体是怎么回事。比如,引物,同源臂,抗性基因在打靶基因上的位置关系,作用什么的,谢谢。
3楼2013-09-14 10:23:51
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