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分类 共搜索到 220 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
考研 339求调剂
本科科研经历包括利用crispr系统防控耐药的基因工程菌的开发（毕设），多粘类芽孢杆菌的基因敲除。工作经历主要为以大肠杆菌和毕赤酵母为底盘菌进行蛋白表达与纯化，成功表达纯化了多种蛋白...
 lzz不聪明 2024-03-15 04:50
分子生物 基因敲除质粒的传代问题
大家好，哪位大侠能解释一下，不可复制的敲除质粒pK18mobsacB载体，转到大肠杆菌里面以后，是怎么扩增和传代的，它不是不可复制质粒吗？
 bio-boy 2024-02-28 08:18
硕博家园 crisper cas9做基因敲除，这么连不上呀
构建基因敲除载体酶连连接不上，载体15000bp，sgrna20bp，用的takaraT4连接酶，25度酶连25min，载体确定切开的跑胶验证过，就是载体胶回收产物浓度有点低，体系是20ul体系，转化到大肠杆菌...
 82637dhunh 2023-12-26 02:39
文献求助 求文献一篇
刘锦辉1，黄建峰2，尤晓颜1，张燕飞2大肠杆菌必需基因的CRISPR-Cas9敲除策略及高效质粒置换方法食品与发酵工业2023120求期刊论文一篇
 guoxingliu 2023-09-22 06:38
药学 抗菌肽的国内外研究进展
明飞平等[22]通过PCR敲除抗菌肽PR39的5石24个核苷酸，再人工...XU等[25]通过选择cecropinA中的1-8个氨基酸序列与Magainin2序列中1-12个氨基酸序列进行拼接，构建杂合肽，并在大肠杆菌中实现了...
 专注多肽 2023-06-09 12:38
分子生物 沙门氏菌基因敲除求大佬指导！
各位大佬，我用的是crispr/cas9系统，想敲除肠炎野生株1000bp左右的基因，cas9一个质粒，sgrna和上下游同源臂一个质粒。cas9和重组sgrna质粒转进...我这两个质粒之前只在大肠杆菌有人做过。...
 GracyGao 2023-05-12 03:11
导师招生 2023/2024博士 微生物/食品发向 学生自荐
克罗诺坂崎杆菌crispr敲除体系建立共构建4个不同骨架的crispr...以j53与c600大肠杆菌为受体菌株对mcr基因阳性菌株进行接合实验，通过双抗性显色平板对接合子进行筛查并通过sanger测序验证。...
 feidi1142 2023-05-12 02:39
分子生物 大肠杆菌同源重组基因敲除失败求指教解决办法
但是最后发现原本的菌株（已知的是有氨苄和卡那抗性）在这个双抗平板上也可以长得很好，所以目前筛选这一步的就陷入了僵境，不知道有没有同行做大肠杆菌基因敲除可以分享一下经验。...
 rqm景生 2023-04-25 07:31
微生物 大肠杆菌同源重组基因敲除筛选失败
但是最后发现原本的菌株（已知的是有氨苄和卡那抗性）在这个双抗平板上也可以长得很好，所以目前筛选这一步的就陷入了僵境，不知道有没有同行做大肠杆菌基因敲除可以分享一下经验。...
 rqm景生 2023-04-25 06:51
分子生物 大肠杆菌BL21 CrisprCas9基因敲除
最近在用双质粒系统pCas和ptargetF做BL21的基因敲除，敲出效率非常低，一个半月只敲掉了一个基因，有大佬指点一下这个实验有什么...pcas也是转进去了，其他就和大肠杆菌的常规操作一样了，为...
 CipherLee 2023-04-12 07:38
硕博家园 大肠杆菌中CRISPR敲除问题
通过CRISPR敲除基因，在双抗板上长出克隆，挑取单克隆进行菌落PCR可以得到相应敲除后的同源臂条带（很专一，并且条带很亮）。...却总能在双抗板上长出许多杂菌，导致覆盖了原本的大肠。...
 吴小仙女 2023-03-28 04:48
生物科学 2020年诺贝尔化学奖CRISPR-Cas9系统
CRISPR-Cas9是在大肠杆菌中发现的一种天然免疫系统，由CRISPR和Cas9两部分组成。...但基因修复会引起插入突变等问题导致基因失活，所以我们可以插入一个想要切割的DNA，从而达到基因敲除或基因...
 utopia_ 2022-09-30 10:09
动植物 肿瘤细菌免疫治疗的研究现状与未来方向
对这些表面抗原的修饰（如基因敲除）...在Jiang等人的一项研究中，研究了大肠杆菌与放射治疗相结合的治疗效果，表明在21Gy的辐射和大肠杆菌产生细胞溶血素a的情况下，结肠肿瘤模型中的肿瘤显著...
 2280ke 2022-08-18 03:03
生物科学 肿瘤细菌免疫治疗的研究现状与未来方向
对这些表面抗原的修饰（如基因敲除）...在Jiang等人的一项研究中，研究了大肠杆菌与放射治疗相结合的治疗效果，表明在21Gy的辐射和大肠杆菌产生细胞溶血素a的情况下，结肠肿瘤模型中的肿瘤显著...
 实验小帮手 2022-08-11 01:43
分子生物 大肠杆菌基因敲除
求有经验大神指导敲除大肠杆菌中某段基因方法
 伤城 2022-07-05 02:09
微生物 CRISPR-Cas9大肠杆菌基因敲除
急求大肠杆菌敲除质粒pREDCAS和pGRB！走过路过的好心人帮忙一下，感谢！
 qinfenghanyu 2022-06-10 02:47
分子生物 大肠杆菌基因敲除
最近在做大肠杆菌基因敲除，扩增的打靶片段总是有一条杂带，胶回收后还是同样位置的一条杂带，目的片段1134bp，杂带2000多bp。位置距离远，没理由切不下来啊？请教一下大家这是什么原因。杂...
 GOubaa 2022-04-19 10:52
导师招生 英国曼彻斯特大学（University of Manchester)金轶课题组招生3.5...
研究背景要求：国内或国外一流高校硕士期间曾熟练掌握大肠杆菌或沙门氏菌基因敲除，或分子生物学，生物化学，化学生物学或结构生物学。已有雅思或托福成绩者优先。英语要求IELTS6.5(单项不...
 cinderella83 2022-04-04 04:35
分子生物 可以帮忙代做大肠杆菌和沙门氏菌的基因敲除和敲入
可以给你代做大肠杆菌和沙门氏菌的基因敲除和敲入，有意向的联系我吧
 lucklizhen 2022-04-02 09:41
生物科学 电转法敲除大肠杆菌K12的目的基因求助帖子
最近一个月一直在做电转，出现过假阳性的情况。但是一直未成功敲除过目的基因，求助大佬。拜托了(=_=)～gyesanghc-material
 初七初七呐 2021-06-19 01:45
微生物 CRISPR-Cas9大肠杆菌基因敲除
急求大肠杆菌敲除质粒ptargetF和pCas，可交换！
 ljvienna 2021-06-09 01:46
硕博家园 细菌基因敲除接合筛选
我在做一个弧菌的基因敲除，使用的是利用自杀质粒的双交换同源重组方法。我将含有重组质粒的大肠杆菌和弧菌涂布到双抗板(弧菌抗氨苄，质粒上有卡那的抗性基因)上后，取长出来的菌做pcr，...
 湛西 2021-04-29 01:03
微生物 细菌基因敲除的接合筛选
我在做一个弧菌的基因敲除，使用的是利用自杀质粒的双交换同源重组方法。我将含有重组质粒的大肠杆菌和弧菌涂布到双抗板(弧菌抗氨苄，质粒上有卡那的抗性基因)上后，取长出来的菌做pcr，...
 湛西 2021-04-29 01:22
分子生物 CRISPR-Cas9大肠杆菌基因敲除
从addgene购买了敲除质粒...然后将pCas9导入大肠杆菌后，转化pCRISPR-sgRNA复苏后涂布双抗平板，菌落长很多，但验出来都是没有敲除的，怎么回事呢？是我忽略了什么重要细节吗？求大神指点！
 ljvienna 2021-04-24 02:27
分子生物 有关大肠杆菌CRISPR/Cas9基因敲除
你们有谁做过大肠杆菌BW25113Cas9大片段基因敲除吗，最近在做，筛选到的总是假阳性，检测Cas质粒和TargetF质粒都在，但是就是不敲除，大神们帮忙分析一下原因
 lzk234 2021-04-05 04:48
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