| 查看: 1387 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题,作者CipherLee将赠送您 10 个金币 | ||
[求助]
大肠杆菌BL21 CrisprCas9基因敲除
|
||
|
最近在用双质粒系统pCas和ptargetF做BL21的基因敲除,敲出效率非常低,一个半月只敲掉了一个基因,有大佬指点一下这个实验有什么需要注意的嘛,效率为什么这么低,敲不掉是常事,我的ptargetF都测序了 都构建成功的,pcas也是转进去了,其他就和大肠杆菌的常规操作一样了,为什么敲不掉呀 @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
» 猜你喜欢
泛 RAS 抑制新思路:大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS?
已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib:激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有131人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录:从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
恩诺沙星(Enrofloxacin)科研解析:分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
RMC-6291怎么用?RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
苯并呋咱全解析:NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
科研人必读:新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
BT-11(Omilancor)研究化合物全解析:从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
|
楼主如果是用dsDNA做同源交換的話建议上下游同源臂有500bp左右,而且加上抗性筛选的话就很明显,其他操作按照杨晟的文章应该是问题不大的,感受态浓度尽可能的浓,dsDNA也建议到300~1000ng/μl 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2023-04-12 19:42:03
3楼2023-04-12 19:44:24










回复此楼