| 查看: 1328 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者CipherLee将赠送您 10 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大肠杆菌BL21 CrisprCas9基因敲除
|
||
|
最近在用双质粒系统pCas和ptargetF做BL21的基因敲除，敲出效率非常低，一个半月只敲掉了一个基因，有大佬指点一下这个实验有什么需要注意的嘛，效率为什么这么低，敲不掉是常事，我的ptargetF都测序了 都构建成功的，pcas也是转进去了，其他就和大肠杆菌的常规操作一样了，为什么敲不掉呀 @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有244人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
3楼2023-04-12 19:44:24
|
楼主如果是用dsDNA做同源交換的話建议上下游同源臂有500bp左右，而且加上抗性筛选的话就很明显，其他操作按照杨晟的文章应该是问题不大的，感受态浓度尽可能的浓，dsDNA也建议到300～1000ng/μl 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2023-04-12 19:42:03
投票:
30