| 查看: 1082 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者CipherLee将赠送您 10 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大肠杆菌BL21 CrisprCas9基因敲除
|
||
|
最近在用双质粒系统pCas和ptargetF做BL21的基因敲除，敲出效率非常低，一个半月只敲掉了一个基因，有大佬指点一下这个实验有什么需要注意的嘛，效率为什么这么低，敲不掉是常事，我的ptargetF都测序了 都构建成功的，pcas也是转进去了，其他就和大肠杆菌的常规操作一样了，为什么敲不掉呀 @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有172人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
3楼2023-04-12 19:44:24
|
楼主如果是用dsDNA做同源交換的話建议上下游同源臂有500bp左右，而且加上抗性筛选的话就很明显，其他操作按照杨晟的文章应该是问题不大的，感受态浓度尽可能的浓，dsDNA也建议到300～1000ng/μl 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2023-04-12 19:42:03
