| 查看: 1028 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者CipherLee将赠送您 10 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大肠杆菌BL21 CrisprCas9基因敲除
|
||
|
最近在用双质粒系统pCas和ptargetF做BL21的基因敲除，敲出效率非常低，一个半月只敲掉了一个基因，有大佬指点一下这个实验有什么需要注意的嘛，效率为什么这么低，敲不掉是常事，我的ptargetF都测序了 都构建成功的，pcas也是转进去了，其他就和大肠杆菌的常规操作一样了，为什么敲不掉呀 @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有95人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
3楼2023-04-12 19:44:24
|
楼主如果是用dsDNA做同源交換的話建议上下游同源臂有500bp左右，而且加上抗性筛选的话就很明显，其他操作按照杨晟的文章应该是问题不大的，感受态浓度尽可能的浓，dsDNA也建议到300～1000ng/μl 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2023-04-12 19:42:03
