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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆某一功能基因的全长，要不要做Race？
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冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)

[求助] 克隆某一功能基因的全长，要不要做Race？ 已有2人参与

本人要克隆乌克兰鳞鲤葡萄糖激酶（GK）的基因全长，现在已经在Genbank中查到了普通鲤鱼(已知两者同属于鲤属)该基因的mRNA的CDS序列（一个是总长2041bp,点击“CDS”会出现带有颜色的一部分序列,长1341bp)，请教各位大虾接下来是就直接利用这段序列的CDS区设计引物吗?克隆全长是克隆1341bp的CDS序列？还是2041bp的总长？还有最重要的就是需不需要做Race，我导师就说克隆未知基因才用Race，尽量不要Race。Race的原理我还不太明白......现在到底该怎么办？我真心迷茫了......跪求各位高人给小弟指条明路......不胜感激

[ Last edited by 冰糖-葫芦娃 on 2013-9-12 at 18:33 ]
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1楼 2013-09-12 18:15:32
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-09-12 20:49:48
http://www.dxy.cn/bbs/topic/4393765
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2楼2013-09-12 18:42:41
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冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-09-12 18:42:41
http://www.dxy.cn/bbs/topic/4393765

那就是说，在pubmed中找到文章就不用做race喽？
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3楼2013-09-12 20:47:30
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冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)
没人来？
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4楼2013-09-16 09:04:58
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nogojin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你导师说的很对！对于这个基因，你选择RT-PCR去克隆就好啦！
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5楼2013-09-16 12:08:56
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yxwjimmy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

扩出来之后要做什么呢？若是做表达或构建载体，直接扩CDS即可；若做polymorphysim，要扩全长
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6楼2014-01-05 21:58:50
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lxy1961

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-07 08:50:36
最好不要做，在保守区设计一段引物，然后用高保真酶拿到最好，建议用fusion DNA聚合酶，http://www.robustnique.com/这个公司的酶就很好，保真性很好，而且还便宜
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7楼2014-01-06 16:26:05
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lxy1961 at 2014-01-06 16:26:05
最好不要做，在保守区设计一段引物，然后用高保真酶拿到最好，建议用fusion DNA聚合酶，http://www.robustnique.com/这个公司的酶就很好，保真性很好，而且还便宜

只在保守区设计引物很难得到完整的CDS吧。。。
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8楼2014-12-10 13:12:26
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