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echochen1017新虫 (初入文坛)
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[求助]
定点突变失败
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| 本人拟在一段蛋白的第416定点突变，引物设计正确，PCR，转化正常，提取质粒也有，送测后，在目的区没有目的突变，而在非目的区发生了突变，请教原因！ |
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 分子生化实验经验积累 |
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starseacow
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设计引物的时候试试这个软件，可以在突变附近通过同义突变增加一个酶切位点，这样可以很方便的挑菌落酶切鉴定是否突变成功。 http://www.psrg.org.uk/sdm-assist.html 参考文献 Karnik A, Karnik R and Grefen C: SDM-assist software to design site-directed mutagenesis primers introducing "silent" restriction sites. BMC Bioinformatics 2013, 14:105; DOI: 10.1186/1471-2105-14-105 http://www.biomedcentral.com/1471-2105/14/105 |
7楼2013-09-06 00:14:19
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fuyuandj86
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