版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yumeng_6964

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2344.4
帖子: 268
在线: 342小时
虫号: 1317780

[交流] 请大神帮我看看我的实时定量PCR结果分析一下失败的原因有图有真相

有图有真相吖
帮忙分析一下谢谢
所用试剂和仪器回复在二楼

Amplification Plot2.jpg

Melt Curve.jpg

Multicomponent Plot.jpg

Raw Data Plot.jpg

RQ vs Sample.jpg

w169h1317780_1378109714_236.jpg

w239h1317780_1378109712_597.jpg

[ Last edited by yumeng_6964 on 2013-9-3 at 10:44 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢已经有7人回复
qPCR结果分析，相对定量已经有3人回复
使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？已经有10人回复
qPCR怎么会出现这种结果？已经有8人回复
半定量RT-PCR与实时定量PCR的研究对象已经有5人回复
Q-PCR和RT-PCR结果不一致呢？已经有3人回复
大神帮我分析分析CV曲线吧，小妹跪求已经有5人回复
定量PCR的熔解曲线分析和PCRmix的选择已经有6人回复
求解：实时荧光定量PCR奇峰已经有18人回复
相对定量荧光PCR结果分析中的SD如何计算？已经有7人回复
求解：Taqman MGB实时荧光定量PCR空白对照组荧光信号很强怎么回事？已经有10人回复
rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。已经有20人回复
Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？已经有7人回复
实时定量PCR 数据处理已经有7人回复
荧光定量PCR(相对定量)的分析结果2-△△Ct怎么看呀? 已经有31人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-09-03 10:43:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 954.6
帖子: 31
在线: 11.2小时
虫号: 989609

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yumeng_6964: 金币+2, 我这次是没加Rox的而且加液过程稍微有点问题我已经加了延伸的步骤试了一下第二次做效果就很好啦~ 2013-09-05 15:54:27

好厉害，怎么能做成这样子呢。
扩增曲线是不是设置的问题，你有没有加rox，没加就设置none。
40循环(95度3s+60度30s),这点加一步72度延伸。
你确定你的模板普通PCR没有问题。

赞一下

回复此楼

4楼2013-09-05 13:22:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 4 个回答

yumeng_6964

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2344.4
帖子: 268
在线: 342小时
虫号: 1317780

反应试剂是Takara SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)；
反应条件按照说明书来95度30s,40循环(95度3s+60度30s),溶解曲线是：95度15s+60度1min+95度15s；
反应仪器是AB 7500 fast.

操作都很小心，冰上进行。每一步都离心，没有气泡。

谢谢啦！！！

赞一下

回复此楼

2楼2013-09-03 10:44:19

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖