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yumeng_6964

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2349.4
帖子: 268
在线: 342.7小时
虫号: 1317780

[交流] 请大神帮我看看我的实时定量PCR结果分析一下失败的原因有图有真相

有图有真相吖
帮忙分析一下谢谢
所用试剂和仪器回复在二楼

Amplification Plot2.jpg

Melt Curve.jpg

Multicomponent Plot.jpg

Raw Data Plot.jpg

RQ vs Sample.jpg

w169h1317780_1378109714_236.jpg

w239h1317780_1378109712_597.jpg

[ Last edited by yumeng_6964 on 2013-9-3 at 10:44 ]

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1楼 2013-09-03 10:43:30

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beautybanana

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-04 16:34:27
yumeng_6964: 金币+3 2013-09-05 15:53:35

你在PCR仪器上打开你扩增结果的软件,把图调出来,调整下纵坐标的范围到合适的值(溶解曲线应该就正常了),扩增曲线你把自动的改为手动的看看,后面的图形应该就不弯曲了.试试

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3楼2013-09-04 16:25:40

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yumeng_6964

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2349.4
帖子: 268
在线: 342.7小时
虫号: 1317780

反应试剂是Takara SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)；
反应条件按照说明书来95度30s,40循环(95度3s+60度30s),溶解曲线是：95度15s+60度1min+95度15s；
反应仪器是AB 7500 fast.

操作都很小心，冰上进行。每一步都离心，没有气泡。

谢谢啦！！！

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2楼2013-09-03 10:44:19

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