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someday1990

金虫 (小有名气)

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[交流] RNA转录为cDNA的试剂盒有哪几种，优缺点各是什么

RNA转录为cDNA的试剂盒有哪几种，优缺点各是什么

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1楼 2013-08-29 08:30:27

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Miss_M

银虫 (初入文坛)

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★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
someday1990: 金币+1, 谢谢 2013-09-08 08:07:58

病毒 RNA 逆转录合成 cDNA 采用反应体系：

随机引物N9(上海生工）       1μL
RNA模板                   5 μL

两者混合后再97℃金属浴中热击 5min，随后立即转移至冰上冷却。再继续加入以下成分：

5×buffer（Promega)       5 μL
200U M-MLV反转录酶(Promega） 1 μL
2.5mM dNTPs（天根）       5 μL
RNasin inhibitor          0.6 μL

DEPC 水补充到 25 μL。

在 PCR 扩增仪上进行反应，
反应循环参数为：95℃  5  min  ，37℃反转录 60  min。