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someday1990

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[交流] RNA转录为cDNA的试剂盒有哪几种，优缺点各是什么

RNA转录为cDNA的试剂盒有哪几种，优缺点各是什么

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1楼 2013-08-29 08:30:27

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王者归来001

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 21:07:30

invitrogen 和 promega 的试剂盒就很好，不够就是有一点贵

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2楼2013-08-29 10:53:15

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fanwq258

木虫 (正式写手)

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★ ★
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takara的也不错，而且现在有活动，半价挺划算的

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3楼2013-08-29 15:28:15

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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

★
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S3太贵，
improv II 性价比高，不买盒子，自己配，很好很强大

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4楼2013-08-29 15:37:29

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Miss_M

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★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 21:07:53
someday1990: 金币+2, 请赐教嘿嘿自己配省钱吧 2013-08-30 07:39:12

我们常年使用promega 反转录试剂 M-MLV反转录酶，手工配比，效果很好。

如果不闲麻烦的话我可以把配方告诉你

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5楼2013-08-29 17:33:32

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咆粑

银虫 (小有名气)

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takara的不错。

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6楼2013-08-29 17:46:48

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Miss_M

银虫 (初入文坛)

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★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
someday1990: 金币+1, 谢谢 2013-09-08 08:07:58

病毒 RNA 逆转录合成 cDNA 采用反应体系：

随机引物N9(上海生工）       1μL
RNA模板                   5 μL

两者混合后再97℃金属浴中热击 5min，随后立即转移至冰上冷却。再继续加入以下成分：

5×buffer（Promega)       5 μL
200U M-MLV反转录酶(Promega） 1 μL
2.5mM dNTPs（天根）       5 μL
RNasin inhibitor          0.6 μL

DEPC 水补充到 25 μL。

在 PCR 扩增仪上进行反应，
反应循环参数为：95℃  5  min  ，37℃反转录 60  min。

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7楼2013-09-06 14:17:36

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