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kebo050551

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA逆转录成cDNA后再-20度能保存多久?已有5人参与

逆转录成cDNA后怎么做两次PCR后就再也P不出来了呢,是不是cDNA降解了?刚做完逆转录后马上PCR扩增的话都能P出来,但是做第二次、第三次就不行了。不过有好几次反复冻融。
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137167741

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
cDNA是比较稳定的,能够存放一段时间的,能够p出来的话,可以回收,克隆,转化到T载体里面,这样子就比较傲容易保存
总有一天我要修改用户名。
2楼2012-08-28 21:00:04
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anyanqiu

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般不会出现你这种问题,不过反转录成cDNA后一般只能放1个月
3楼2012-08-28 22:22:17
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jl860822

金虫 (正式写手)


如果抑一直放在-20的话,应该一个月是没问题的,反复冻融的话,就不好说了
4楼2012-08-29 08:35:39
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jqq1985

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以放很久的。我曾经用过在-20度放了半年的cDNA做过RT,不过之前我提的量比较大。.
5楼2012-08-29 12:31:57
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过期巧克力

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
cDNA一般比较稳定不太会降解的,我的放了几个月快半年了还是能跑出很好的条带,不过你如果取样比较麻烦想长期保存的话,最好还是存到-80.但是5’cDNA就没那么稳定 了,个把月就可能降解掉。
6楼2014-11-20 09:53:48
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