someday1990

病毒 RNA 逆转录合成 cDNA 采用反应体系：

随机引物N9(上海生工）       1μL
RNA模板                   5 μL

两者混合后再97℃金属浴中热击 5min，随后立即转移至冰上冷却。再继续加入以下成分：

5×buffer（Promega)       5 μL
200U M-MLV反转录酶(Promega） 1 μL
2.5mM dNTPs（天根）       5 μL
RNasin inhibitor          0.6 μL

DEPC 水补充到 25 μL。

在 PCR 扩增仪上进行反应，
反应循环参数为：95℃  5  min  ，37℃反转录 60  min。

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7楼2013-09-06 14:17:36

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wxl.1989822

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我们一直用的takara的 PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Erase很好用的

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8楼2013-09-06 15:35:54

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