应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 想请教一下做RACE时，特异性引物的设计问题，以及如何根据同源保守区设计引物？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2781  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zqxy1223

铁虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下做RACE时，特异性引物的设计问题，以及如何根据同源保守区设计引物？

我是一个做分子生物学的新手，老师也没太多时间知道，所以的问题都要靠自己摸索。所以我的问题在您看来若很弱智，请您耐心的解答，非常感谢。
    我想在利用RACE方法做植物上一个基因的全长，根据同源克隆法，利用DNAMAN比对序列后，如何选取保守区，选择保守区序列的位置和原则是什么？又如何根据保守区设计3‘引物和5’引物？还是先做3‘race,根据pcr产物再做5’race?非常感谢。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验 RACE

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-08-22 20:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqxy1223

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fantasist001 at 2013-08-23 21:51:20
确保每个引物的3‘端都在完全or最保守区。先做3端是正道。

因为我没有已知片段，我是不是应该先设计简并引物，P出一段序列，在做3‘端啊？
赞一下 回复此楼
8楼2013-08-24 10:05:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-23 11:45:40
首先得NCBI上找到相似物种的cDNA序列，比对下，根据同源保守区（就是物种之间都没有变化的序列）设计两条GSP，两者之间隔个100bp-200bp左右吧！3‘RACE简单点
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-08-22 21:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqxy1223

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-08-22 21:33:39
首先得NCBI上找到相似物种的cDNA序列，比对下，根据同源保守区（就是物种之间都没有变化的序列）设计两条GSP，两者之间隔个100bp-200bp左右吧！3‘RACE简单点

可是我的这个基因我选取的保守区，设计的引物GC含量都很低，已经设计了多条，都很低，该怎么办？
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-23 15:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zqxy1223 at 2013-08-23 15:23:03
可是我的这个基因我选取的保守区，设计的引物GC含量都很低，已经设计了多条，都很低，该怎么办？...

primer长度25-27bp左右吧，GC%有40吗？理论很多时候和实际不一样的，建议你多设计几条！3‘相对来说简单多了，问题应该不大。
赞一下 回复此楼
5楼2013-08-23 20:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +5 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 5/250 2026-03-29 23:53 by yokiii1
[考研] 070300化学354求调剂 +6 101次希望 2026-03-28 6/300 2026-03-29 12:57 by 无际的草原
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 0703化学 +11 妮妮ninicgb 2026-03-27 11/550 2026-03-29 06:45 by 544594351
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +3 nhj_ 2026-03-25 3/150 2026-03-28 13:24 by Iveryant
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +5 SYA！ 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭