北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2780  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zqxy1223

铁虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下做RACE时,特异性引物的设计问题,以及如何根据同源保守区设计引物?

我是一个做分子生物学的新手,老师也没太多时间知道,所以的问题都要靠自己摸索。所以我的问题在您看来若很弱智,请您耐心的解答,非常感谢。
    我想在利用RACE方法做植物上一个基因的全长,根据同源克隆法,利用DNAMAN比对序列后,如何选取保守区,选择保守区序列的位置和原则是什么?又如何根据保守区设计3‘引物和5’引物?还是先做3‘race,根据pcr产物再做5’race?非常感谢。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验 RACE

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fantasist001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确保每个引物的3‘端都在完全or最保守区。先做3端是正道。
6楼2013-08-23 21:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-23 11:45:40
首先得NCBI上找到相似物种的cDNA序列,比对下,根据同源保守区(就是物种之间都没有变化的序列)设计两条GSP,两者之间隔个100bp-200bp左右吧!3‘RACE简单点
3楼2013-08-22 21:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqxy1223

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-08-22 21:33:39
首先得NCBI上找到相似物种的cDNA序列,比对下,根据同源保守区(就是物种之间都没有变化的序列)设计两条GSP,两者之间隔个100bp-200bp左右吧!3‘RACE简单点

可是我的这个基因我选取的保守区,设计的引物GC含量都很低,已经设计了多条,都很低,该怎么办?
4楼2013-08-23 15:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zqxy1223 at 2013-08-23 15:23:03
可是我的这个基因我选取的保守区,设计的引物GC含量都很低,已经设计了多条,都很低,该怎么办?...

primer长度25-27bp左右吧,GC%有40吗?理论很多时候和实际不一样的,建议你多设计几条!3‘相对来说简单多了,问题应该不大。
5楼2013-08-23 20:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +3 兔兔兔111223314 2026-03-29 3/150 2026-03-29 23:14 by Evan_Liu
[考研] 281求调剂 +4 亚克西good 2026-03-26 6/300 2026-03-29 21:06 by 啊李999
[考研] 289求调剂 +5 BrightLL 2026-03-29 5/250 2026-03-29 17:24 by zhyzzh
[考研] 085600,专业课化工原理,321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
信息提示
请填处理意见