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麻烦大家给看一下我做的荧光定量PCR溶解曲线
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tomatohu
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麻烦大家给看一下我做的荧光定量PCR溶解曲线
我的产物应该是后面的那个大峰,请问一下前面的那个小峰是什么啊,看溶解温度应该不是引物二聚体啊?我做普通PCR的时候没有看见非特异峰啊。有没有高人知道指点一下吧,谢谢啦!
溶解曲线.JPG
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2013-08-14 15:05:52
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wangweida2
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助!
2013-08-14 17:45:15
应该是引物二聚体的峰,你可以把荧光PCR产物跑胶看下有没有二聚体条带。
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2楼
2013-08-14 15:52:16
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tomatohu
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可是引物二聚体的溶解峰不都在70左右吗
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3楼
2013-08-14 16:01:52
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tomatohu
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注册: 2009-04-09
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专业: 石油、天然气地质学
而且我的阴性对照里也没有这个峰啊,但是里面应该也有引物二聚体那
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4楼
2013-08-14 16:04:35
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Jianxiao_H
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专业: 微生物学
【答案】应助回帖
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tomatohu(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流!
2013-08-14 17:45:27
二聚体的可能性比较小吧,不过也不排除。
可能是mispriming的非特异性产物。
跑胶看看
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多少辛酸不可告人。
5楼
2013-08-14 16:16:35
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