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tomatohu

铁虫 (小有名气)

[求助] 麻烦大家给看一下我做的荧光定量PCR溶解曲线

我的产物应该是后面的那个大峰,请问一下前面的那个小峰是什么啊,看溶解温度应该不是引物二聚体啊?我做普通PCR的时候没有看见非特异峰啊。有没有高人知道指点一下吧,谢谢啦!
麻烦大家给看一下我做的荧光定量PCR溶解曲线
溶解曲线.JPG
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-14 17:45:15
应该是引物二聚体的峰,你可以把荧光PCR产物跑胶看下有没有二聚体条带。
2楼2013-08-14 15:52:16
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tomatohu

铁虫 (小有名气)

可是引物二聚体的溶解峰不都在70左右吗
3楼2013-08-14 16:01:52
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tomatohu

铁虫 (小有名气)

而且我的阴性对照里也没有这个峰啊,但是里面应该也有引物二聚体那
4楼2013-08-14 16:04:35
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Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
tomatohu(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-08-14 17:45:27
二聚体的可能性比较小吧,不过也不排除。
可能是mispriming的非特异性产物。
跑胶看看
多少辛酸不可告人。
5楼2013-08-14 16:16:35
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