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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 转化老失败,求原因
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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)

[求助] 转化老失败,求原因

我做转化老是出现很多的失败,但不知道原因,我想可能是不是感受态从-80度冰箱拿出来放太久了,我一般解冻的时间是10分钟
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1楼2013-08-12 09:17:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

风影一生

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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你的是什么宿主菌？
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7楼2013-08-12 13:17:39
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普通回帖

堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不会啊，我一般放半个小时以上呢，你做过对比实验没啊？克隆这个东西影响因素很多，建议LZ设计个对比试验，对了你的感受态是放在冰上解冻的吧
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2楼2013-08-12 10:15:44
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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可乐galaxy: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2013-08-13 08:47:37
放到冰上解冻，不会有影响的，这个原因可以排除，你指的失败是什么意思，不涨菌吗？
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3楼2013-08-12 10:21:49
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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-08-12 10:15:44
不会啊，我一般放半个小时以上呢，你做过对比实验没啊？克隆这个东西影响因素很多，建议LZ设计个对比试验，对了你的感受态是放在冰上解冻的吧

是放冰上,但就是没长出来,求原因
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4楼2013-08-12 12:13:46
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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-12 10:21:49
放到冰上解冻，不会有影响的，这个原因可以排除，你指的失败是什么意思，不涨菌吗？

对的
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5楼2013-08-12 12:28:22
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
可乐galaxy: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-08-13 08:45:20
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4楼: Originally posted by 可乐galaxy at 2013-08-12 12:13:46
是放冰上,但就是没长出来,求原因...

我说了啊，原因很多，氨苄过期了也不会长菌啊，你最好就是要自己设计个对照实验，而且你给的信息这么少，很难给你找到原因啊
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6楼2013-08-12 13:00:58
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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可乐galaxy: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2013-08-13 08:47:14
影响转化的因素很多，主要有感受态解冻时间不宜过长，加入DNA浓度量不宜过多也不能太少，激活时间不要过久一般在90S。再就是摇菌时间45-60min，涂板菌数量，培养板抗性等,自己每步确定一下。
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成功，就是成为你想成为的人
8楼2013-08-12 15:09:50
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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-08-12 13:00:58
我说了啊，原因很多，氨苄过期了也不会长菌啊，你最好就是要自己设计个对照实验，而且你给的信息这么少，很难给你找到原因啊...

抱歉,抱歉,是我们师兄做的感受态放太久了,后来换了感受态就好了,灰常抱歉,还是很感谢你
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9楼2013-08-13 08:44:47
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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 风影一生 at 2013-08-12 13:17:39
你的是什么宿主菌？

对不起,我的感受态有问题,现在好了
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10楼2013-08-13 08:46:26
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