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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR退火温度 Tm值
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liuyi8203

金虫 (小有名气)

[求助] PCR退火温度 Tm值

合成了引物，引物单子上的 %GC， %GC  Tm，Therm. Tm分别表示什么意思？做PCR的时候应该选哪一个作为退火温度呢？谢谢！

[ Last edited by liuyi8203 on 2013-8-9 at 09:56 ]
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1楼 2013-08-09 09:14:17
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liuyi8203

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 一直寂寞的鱼 at 2013-08-09 09:57:17
一般退火温度为上游引物的TM值和下游引物的TM值相加后除以2，再减3为一般 退火温度，但是不绝对，可以做梯度确定具体的退火温度！

请看清楚题目，谢谢！
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3楼2013-08-09 10:04:04
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一直寂寞的鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-09 13:02:19
一般退火温度为上游引物的TM值和下游引物的TM值相加后除以2，再减3为一般 退火温度，但是不绝对，可以做梯度确定具体的退火温度！
赞一下(1人) 回复此楼
幸福永远
2楼2013-08-09 09:57:17
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nannanz2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-08-09 13:02:28
我们一般以上下游引物的Tm值中的较小的那个减去3到5度，进行PCR扩增
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-09 10:06:00
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
退火温度Tm=（T+A）X 2+（G+C）X 4 — 5
赞一下 回复此楼
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
5楼2013-08-09 11:55:11
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