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大家好,我最近用金斯瑞的Ni柱纯化我的蛋白(带His6),上样过程会穿过挺多,吸附也较弱(说明书上的缓冲液 Lysis Equilibration Buffer (LE buffer): 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, pH 8.0 Wash Buffer: 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0 Elution buffer: 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 8.0 就是用10mM咪唑洗杂,我用10mM咪唑基本洗脱了),想问大家,Ni柱有哪些上样方式,可以把柱材和我样品混匀过夜,第二天装柱吗?大家平时还用什么缓冲液效果好,谢谢大家 |
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bullfrog325
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zhang1zheng2
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