| 查看: 1411 | 回复: 9 | ||||
[求助]
PCR重复不出来
|
||||
| pcr做了几次，之前能P出来的，可是现在就是怎样都做不出来了，有时就算做出来条带也是非常的浅，只是为什么呢？12K左右的片段，是我的问题，还是这个确实是重复性不好？ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有68人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR重复不出来
已经有7人回复
- 一直都能PCR出来的产物，怎么重复不出来了
已经有11人回复
- 单个碱基突变的PCR条件如何优化
已经有11人回复
- 线粒体基因控制区CR含重复序列，为什么PCR产物直接测序不准，而要纯化或者克隆再测序
已经有12人回复
- PCR批出非目标带，空白对照都有，重复进行，有时有，有时没有，咋回事？
已经有8人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- 求助，换了高保真酶扩不出来目的条带
已经有26人回复
- PCR好多次了，一直没结果，麻烦各位帮我看看是哪出问题了？
已经有15人回复
- 菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？
已经有16人回复
- PCR重复不出来
已经有20人回复
- 求解释这pcr是啥问题，帮同学问的^_^
已经有29人回复
- CTAB 基因提取方法的问题
已经有10人回复
- PCR鉴定与酶切鉴定
已经有11人回复
- PCR, southern 转基因植物阳性检测
已经有4人回复
- 【求助/交流】请教个关于inverse PCR的问题
已经有21人回复
- 【求助/交流】PCR重复不出来，怎么回事？
已经有27人回复
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 回帖置顶 2013-07-27 09:09:07
1949stone: 回帖置顶 2013-07-27 09:09:07
|
长片段的DNA片段的确不太好扩增 1. 不知道楼主扩增12K这么长的片段，用的是什么模板，基因组DNA还是cDNA模板？模板的质量怎样？ 2. 扩增12K的长片段目的是什么呢，是鉴定还是构建表达载体？如果是构建表达载体，有没有考虑过分段扩增克隆呢，然后再把片段fusion起来 3. 可以换一些扩增能力比较强的可以扩长片段的Taq酶试试，比如GoTaq, LA-Taq, Primerstar 4. 可以优化一下体系，在PCR体系里面加一些反应增强剂比如可以加些DMSO至终浓度5% 希望对你有启发！ [ Last edited by gyesang on 2013-7-26 at 17:37 ] |
3楼2013-07-26 17:34:06
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 194.3
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2013-07-26 16:55:57
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-07-27 00:51:50
swxlijie
新虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 29.4
- 散金: 212
- 帖子: 251
- 在线: 32.6小时
- 虫号: 1464900
- 注册: 2011-10-28
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
5楼2013-07-27 09:09:17
biomed_fanyi 
新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2013-07-27 11:26:17
Sthunder
木虫 (正式写手)
- 应助: 130 (高中生)
- 金币: 2337.8
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 308
- 在线: 176.6小时
- 虫号: 2551016
- 注册: 2013-07-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2013-07-27 11:43:02
8楼2013-07-27 11:50:08
yb19841014
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 21099
- 散金: 5
- 红花: 2
- 帖子: 2549
- 在线: 155.6小时
- 虫号: 2256089
- 注册: 2013-01-23
- 专业: 河口海岸学
9楼2013-07-28 19:24:59
10楼2013-07-29 12:35:26
