24小时热门版块排行榜    

查看: 810  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 重叠延伸PCR

各位大侠:
我要做三个片段进行重叠延伸PCR将他们连接起来成一个长片段,引物该如何设计?长度应该是多少?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by huoyongting at 2013-07-26 15:19:44
其实也没必要两两混合,我最近做过几个都是十几条长引物混到一起扩的,都做出来了,为了省钱,全基因合成还是太贵了

这个还是要取决她融合基因的长度,如果要融合几K的话,合成引物回来混一起扩增,还是蛮费钱的,都差不多吧,除了基因合成,都得做PCR,就看哪个可靠和稳定
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-07-26 17:19:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
761429495(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩,gy版热心肠 2013-07-25 23:26:08
三个片段,假设是A,B,C,设计引物是AB有一段overlap,BC有一段overlap,overlap我做过最短18bp的,一般25bp,基因特异引物就是普通的设计方法,跑PCR时,AB fusion,BCfusion,然后跑胶回收,将AB 和BC一起跑,这个描述起来,对我来说很复杂,谅解哈
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-07-25 16:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

史前五百年

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这方面文献横多的,楼主可以找些看看,2楼说的经典。就是这个意思。
3楼2013-07-26 10:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huoyongting

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实也没必要两两混合,我最近做过几个都是十几条长引物混到一起扩的,都做出来了,为了省钱,全基因合成还是太贵了
4楼2013-07-26 15:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 21/1050 2026-08-31 18:04 by 异氰酸酯
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见