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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定点突变出现的问题出现重复序列
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zcf1990

银虫 (初入文坛)

[交流] 定点突变出现的问题出现重复序列

我在做定点突变出现以下问题：我想讲227位的F突变成S其序列入下图：

ACCAGAGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGCCATTCTGCAAAGTGGTT
CCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCTCCAATGCTCCTTGGGCGGTGCCATTCTGCAAAGTGGT
TCCTCCAATGCTCCT
红色为突变的点，氨基酸突变没有问题，可是长度却重复了相同的引物长度4次，不知道哪里出了问题~~求解~~
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1楼 2013-07-24 14:22:54
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ccharlien

木虫 (正式写手)
★
zcf1990(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
17楼: Originally posted by zcf1990 at 2013-07-25 17:29:25
那你有没有克服这个问题 ，据小老板说他做一次对一次，重来没遇到过~~...

你小老板说的也不算夸张了
我做的十几次定点突变质粒 也没遇到过你这情况
一般挑三个测序 至少两个是对的
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18楼2013-07-26 04:48:40
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
zcf1990(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-24 16:41:27
PCR过程中引入的，连续几段突变引物，重新挑取其他克隆测序，肯定有正常突变的。
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8楼2013-07-24 16:20:33
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
zcf1990(金币+1): 谢谢参与
一楼正解, 多挑几个克隆就成
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11楼2013-07-24 18:03:38
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zcf1990

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-07-24 16:20:33
PCR过程中引入的，连续几段突变引物，重新挑取其他克隆测序，肯定有正常突变的。

不止一次出现，有没有办法抵制这种现象的发生~~我小老板说他做克隆从来没出现这种现象，还说他的克隆只挑一个，而且都是对的~~
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13楼2013-07-24 20:55:46
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