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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何扩展高度重复序列
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zhni1985

新虫 (小有名气)

[交流] 如何扩展高度重复序列 已有3人参与

我有个基因很难扩。重基因组上扩增这个ORF，基因组是测过序的，基因序列已知。
基因重复序列很多，primer premier 5设计引物，反向引物特异性较好，正向引物特异性很差，错配值ΔG为-35。但是只能在那里设计正向引物，引物要扩完整的0RF，做表达。不知道有没有比较好的酶来扩这个序列？或者比较特别的PCR程序来扩。
现在完全扩不到目的条带。
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人生在于奋斗 奋斗在于守恒
1楼 2012-10-11 11:06:55
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”
★
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你最好用高保真酶去扩，现在这样的产品很多，经济允许就买进口的，扩增体系就按照说明书的来！
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持之以恒、永不放弃！
2楼2012-10-11 11:12:24
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我看到你说基因序列已经，基因组也测过了。那能不能请问一下，你扩它具体用来干啥？
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3楼2012-10-11 14:13:30
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zhni1985

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-10-11 14:13:30
我看到你说基因序列已经，基因组也测过了。那能不能请问一下，你扩它具体用来干啥？

表达做抗体，另外做一些体外的活性分析。
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人生在于奋斗 奋斗在于守恒
4楼2012-10-12 15:53:14
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zhjhappy90

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好我也遇到这个问题了请问你最后是怎么扩增出来的
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5楼2013-03-21 14:36:53
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