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如何扩展高度重复序列
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zhni1985
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[交流]
如何扩展高度重复序列
已有3人参与
我有个基因很难扩。重基因组上扩增这个ORF,基因组是测过序的,基因序列已知。
基因重复序列很多,primer premier 5设计引物,反向引物特异性较好,正向引物特异性很差,错配值ΔG为-35。但是只能在那里设计正向引物,引物要扩完整的0RF,做表达。不知道有没有比较好的酶来扩这个序列?或者比较特别的PCR程序来扩。
现在完全扩不到目的条带。
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人生在于奋斗 奋斗在于守恒
1楼
2012-10-11 11:06:55
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gwd0312
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你最好用高保真酶去扩,现在这样的产品很多,经济允许就买进口的,扩增体系就按照说明书的来!
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持之以恒、永不放弃!
2楼
2012-10-11 11:12:24
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gaoyang636
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专业: 基因组学
★
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我看到你说基因序列已经,基因组也测过了。那能不能请问一下,你扩它具体用来干啥?
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3楼
2012-10-11 14:13:30
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zhni1985
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专业: 微生物生理与生物化学
引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
gaoyang636
at 2012-10-11 14:13:30
我看到你说基因序列已经,基因组也测过了。那能不能请问一下,你扩它具体用来干啥?
表达做抗体,另外做一些体外的活性分析。
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人生在于奋斗 奋斗在于守恒
4楼
2012-10-12 15:53:14
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zhjhappy90
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好我也遇到这个问题了请问你最后是怎么扩增出来的
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5楼
2013-03-21 14:36:53
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