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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】反向重复序列检测

大肠杆菌里转进去的载体上有两段反向重复序列,我提质粒想扩增其中的一段,但是扩不出来,扩增这个载体上的别的片段能扩出来,这会不会是因为这两段反向重复形成发夹结构使我无法检测到它的存在?虫友们帮忙分析一下

[ Last edited by muyuan on 2010-10-26 at 14:35 ]
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

自己顶一下
2楼2010-10-26 14:40:09
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲


muyuan(金币+1):谢谢参与
两段反向重复形成发夹结构使我无法检测到它的存在


其中的一个重要原因。可以尝试切断质粒在后续做其他实验。
3楼2010-10-26 14:44:30
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

但质粒是双链DNA,这个有影响吗
4楼2010-10-26 15:04:08
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

PCR变性时会分开,看来还是找找其他原因了
5楼2010-10-26 16:33:45
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