24小时热门版块排行榜    

查看: 1322  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhni1985

新虫 (小有名气)

[交流] 如何扩展高度重复序列 已有3人参与

我有个基因很难扩。重基因组上扩增这个ORF,基因组是测过序的,基因序列已知。
基因重复序列很多,primer premier 5设计引物,反向引物特异性较好,正向引物特异性很差,错配值ΔG为-35。但是只能在那里设计正向引物,引物要扩完整的0RF,做表达。不知道有没有比较好的酶来扩这个序列?或者比较特别的PCR程序来扩。
现在完全扩不到目的条带。
回复此楼
人生在于奋斗 奋斗在于守恒
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我看到你说基因序列已经,基因组也测过了。那能不能请问一下,你扩它具体用来干啥?
3楼2012-10-11 14:13:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你最好用高保真酶去扩,现在这样的产品很多,经济允许就买进口的,扩增体系就按照说明书的来!
持之以恒、永不放弃!
2楼2012-10-11 11:12:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhni1985

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-10-11 14:13:30
我看到你说基因序列已经,基因组也测过了。那能不能请问一下,你扩它具体用来干啥?

表达做抗体,另外做一些体外的活性分析。
人生在于奋斗 奋斗在于守恒
4楼2012-10-12 15:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjhappy90

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好我也遇到这个问题了请问你最后是怎么扩增出来的
5楼2013-03-21 14:36:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +3 scalable 2026-08-24 3/150 2026-08-24 15:02 by arzu_hma
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +15 koalala 2026-08-24 17/850 2026-08-24 14:16 by hhs666
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +12 kulium 2026-08-21 15/750 2026-08-24 12:02 by iaeyuan
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见