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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定点突变出现的问题出现重复序列
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zcf1990

银虫 (初入文坛)

[交流] 定点突变出现的问题出现重复序列

我在做定点突变出现以下问题：我想讲227位的F突变成S其序列入下图：

ACCAGAGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGCCATTCTGCAAAGTGGTT
CCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCTCCAATGCTCCTTGGGCGGTGCCATTCTGCAAAGTGGT
TCCTCCAATGCTCCT
红色为突变的点，氨基酸突变没有问题，可是长度却重复了相同的引物长度4次，不知道哪里出了问题~~求解~~
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1楼 2013-07-24 14:22:54
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ccharlien

木虫 (正式写手)
★
zcf1990(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
17楼: Originally posted by zcf1990 at 2013-07-25 17:29:25
那你有没有克服这个问题 ，据小老板说他做一次对一次，重来没遇到过~~...

你小老板说的也不算夸张了
我做的十几次定点突变质粒 也没遇到过你这情况
一般挑三个测序 至少两个是对的
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18楼2013-07-26 04:48:40
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ccharlien

木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by zcf1990 at 2013-07-26 08:26:06
我们实验室两个不同方向的定点突变都碰到这种问题，而且是不同的人不同时间做的反应，先前怀疑是反应的buffer或者是试剂有问题，可是换了之后还是没有解决这个问题~~真心希望碰到过的朋友帮忙解决下，要不然一直在 ...

我觉得要么是pcr程序问题要么是引物的问题
赞一下(1人) 回复此楼
21楼2013-07-26 15:36:27
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