24小时热门版块排行榜    

查看: 3411  |  回复: 24
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zcf1990

银虫 (初入文坛)


[交流] 定点突变出现的问题出现重复序列

我在做定点突变出现以下问题:我想讲227位的F突变成S其序列入下图:

ACCAGAGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGCCATTCTGCAAAGTGGTT
CCSample TextAATGCTCCTTGGGCGGGCCATTCTGCAAAGTGGTTCCTCCAATGCTCCTTGGGCGGTGCCATTCTGCAAAGTGGT
TCCTCCAATGCTCCT
红色为突变的点,氨基酸突变没有问题,可是长度却重复了相同的引物长度4次,不知道哪里出了问题~~求解~~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累 EndNoteX7VOL.rar 博士学习 重复序列PCR扩增

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)



zcf1990(金币+1): 谢谢参与
一楼正解, 多挑几个克隆就成
11楼2013-07-24 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答
★ ★ ★
zcf1990(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-24 16:41:27
PCR过程中引入的,连续几段突变引物,重新挑取其他克隆测序,肯定有正常突变的。
8楼2013-07-24 16:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcf1990

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
8楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-07-24 16:20:33
PCR过程中引入的,连续几段突变引物,重新挑取其他克隆测序,肯定有正常突变的。

不止一次出现,有没有办法抵制这种现象的发生~~我小老板说他做克隆从来没出现这种现象,还说他的克隆只挑一个,而且都是对的~~
13楼2013-07-24 20:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
zcf1990: 金币+2, 现在重新做,希望能减少这种现象的产生~~ 2013-07-25 08:34:08
引用回帖:
13楼: Originally posted by zcf1990 at 2013-07-24 20:55:46
不止一次出现,有没有办法抵制这种现象的发生~~我小老板说他做克隆从来没出现这种现象,还说他的克隆只挑一个,而且都是对的~~...

减少模板和引物的用量,同时循环数减少到20-25循环。
14楼2013-07-25 07:50:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 生物学调剂 +3 Surekei 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:31 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
信息提示
请填处理意见