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HPLC酶活测定
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HPLC酶活测定底物是否也是要色谱纯的呢？底物和生成物都需要测定吗？还有底物和底物的标准品使用一样的药品呢还是需要分别买？ [ Last edited by longyh6411 on 2013-7-23 at 20:42 ] |
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铁杆木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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longyh6411: 金币+50, ★有帮助 2013-09-18 16:17:30
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longyh6411: 金币+50, ★有帮助 2013-09-18 16:17:30
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问的有些笼统了，不太知道你到底想了解什么 尝试着回答一下了： 1. 你做这个实验的目的是什么？想知道转化率还是酶活？这是两个完全同的方法：酶活的话，你需要in situ的做法，这个要求你要能够控制好反应体系的反应速率，否则你计算出的Km和Vmax误差较大。如果你测量转化率，只需要注意测量精度和反应时间了。 2. 如果是活性测量，只需要关注一个。如果你是侧转化率，需要两个都做，然后用守恒来验证你测量的正确与否。 3. 至于底物，取决于你用什么了，这个没有定论。 |
2楼2013-07-23 21:16:07
