24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

duke188

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 138.5
散金: 5
帖子: 42
在线: 6.5小时
虫号: 2495026
注册: 2013-06-04
专业: 细胞死亡

[求助] 梯度PCR退火温度

上游TTACAAGATGGAGCCTCACC(GC含量50%)
Tm(1M Na+)：68.2
Tm(50mM Na+)：46.6
下游CAAAGAATAACCCAGGACGA(GC含量45%)
Tm(1M Na+)：66.2
Tm(50mM Na+)：44.6
顺便问下大家，Tm(1M Na+)和Tm(50mM Na+)有什么区别啊?
我该选择哪个Tm啊？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

pcr目的条带暗，怎么办呢？？已经有25人回复
退火温度的优化已经有6人回复
关于PCR的退火温度已经有4人回复
通过梯度PCR摸索的最佳退火温度，扩出来的条带不太亮，帮忙分析那些引物不可以用已经有5人回复
求解PCR问题《忘记加水的前后》已经有13人回复
PCR出现非特异性扩增，求高手解答已经有9人回复
揪心的菌落PCR 已经有16人回复
PCR中退火温度的选择已经有11人回复
PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？已经有4人回复
求助：约6kb质粒做模板的pcr程序怎么设定啊已经有12人回复
请高手看看我的PCR图片已经有28人回复
关于PCR退火温度已经有17人回复
PCR扩增不出条带已经有9人回复
真菌ITS序列PCR扩增求助已经有9人回复
【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？已经有15人回复
【求助/交流】PCR退火温度已经有8人回复
【求助】PCR退火温度及时间如何确定已经有10人回复
【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why? 已经有20人回复
PCR退火温度已经有14人回复

1楼 2013-07-21 21:38:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hyc_charles

金虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 611.7
红花: 3
帖子: 77
在线: 13.8小时
虫号: 2469166
注册: 2013-05-17
专业: 作物种质资源与遗传育种学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-23 08:21:20

PCR退火温度做梯度的话，一般采取从高于TM值10℃的温度开始，比如你的TM值是55℃那么你从65℃开始做梯度。另外可以坐下touch down试试，每个循环降0.7℃或者1℃，一般可以得到目的条带，我是这么做的，供你参考下

赞一下

回复此楼

不但要做一个优秀的人，更要做一个无可取代的人…

7楼2013-07-22 18:37:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 duke188 的主题更新

返回列表