应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母表达蛋白纯化
51/1返回列表
查看: 2857  |  回复: 10
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

梦中江楼

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母表达蛋白纯化

本人刚开始做实验，毕赤酵母用甲醇诱导表达的蛋白在培养基中，应该怎样提纯，蛋白加了His-tag标签，用镍和层析怎样处理培养基？求镍和层析的具体纯化步骤。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-07-21 09:12:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 梦中江楼 at 2013-07-23 08:56:38
我的蛋白在培养基里，是不是说不需要超声破菌这一步，直接上柱就可以了？...

不需要破碎细胞的。
赞一下 回复此楼
7楼2013-07-23 09:30:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你去看IMAC说明书了，上面应该写的很清楚
不过你现确定酵母的破胞，那个比E.coli麻烦
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-22 20:51:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-23 08:19:17
既然是分泌在培养基中，先过个超滤膜，把蛋白浓缩下，然后溶解在上样缓冲液中，上镍亲和柱，后面的方法就和普通的镍柱亲和层析一样了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-23 07:54:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦中江楼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-07-23 07:54:56
既然是分泌在培养基中，先过个超滤膜，把蛋白浓缩下，然后溶解在上样缓冲液中，上镍亲和柱，后面的方法就和普通的镍柱亲和层析一样了。

我的蛋白在培养基里，是不是说不需要超声破菌这一步，直接上柱就可以了？
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-23 08:56:38
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭