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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR实验结果与酶用量有关吗？
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] PCR实验结果与酶用量有关吗？ 已有9人参与

不知道大家有没有遇到过这样的情况，我用的是宝生物的普通Taq酶，25微升体系，按照50微升体系减半后扩增出很浅的条带，只把酶用量加倍后无条带，但是引物二聚体比以前亮多了，PCR结果跟酶用量有关吗？
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1楼 2013-07-12 16:45:49
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ml1294

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是没关系， 退火温度 循环数调整一下 或是模板
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4楼2013-07-14 08:58:09
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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2楼2013-07-13 23:44:57
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肃清华书

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 正解！ 2013-07-14 14:52:28
酶加多了以后会导致非特异性扩增增多，所以一般加1U的酶就够用了
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3楼2013-07-14 08:50:53
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figmeiling

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-14 14:52:41
25ul的体系只需要1ul的酶，加多了也无用。但PCR结果与退火温度与模板有很大的关系。尤其是退火温度要找准，不然就扩增不出所需要的目的条带。
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5楼2013-07-14 14:25:08
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