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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

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[交流] PCR实验结果与酶用量有关吗？已有9人参与

不知道大家有没有遇到过这样的情况，我用的是宝生物的普通Taq酶，25微升体系，按照50微升体系减半后扩增出很浅的条带，只把酶用量加倍后无条带，但是引物二聚体比以前亮多了，PCR结果跟酶用量有关吗？

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1楼 2013-07-12 16:45:49

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figmeiling

新虫 (初入文坛)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-14 14:52:41

25ul的体系只需要1ul的酶，加多了也无用。但PCR结果与退火温度与模板有很大的关系。尤其是退火温度要找准，不然就扩增不出所需要的目的条带。

5楼2013-07-14 14:25:08

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匿名

用户注销 (著名写手)

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2楼2013-07-13 23:44:57

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肃清华书

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gyesang: 金币+2, 正解！ 2013-07-14 14:52:28

酶加多了以后会导致非特异性扩增增多，所以一般加1U的酶就够用了

3楼2013-07-14 08:50:53

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ml1294

银虫 (小有名气)

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应该是没关系，退火温度循环数调整一下或是模板

4楼2013-07-14 08:58:09

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