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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] PCR实验结果与酶用量有关吗? 已有9人参与

不知道大家有没有遇到过这样的情况,我用的是宝生物的普通Taq酶,25微升体系,按照50微升体系减半后扩增出很浅的条带,只把酶用量加倍后无条带,但是引物二聚体比以前亮多了,PCR结果跟酶用量有关吗?
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肃清华书

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 正解! 2013-07-14 14:52:28
酶加多了以后会导致非特异性扩增增多,所以一般加1U的酶就够用了
3楼2013-07-14 08:50:53
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匿名

用户注销 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
2楼2013-07-13 23:44:57
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ml1294

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该是没关系, 退火温度 循环数调整一下 或是模板
4楼2013-07-14 08:58:09
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figmeiling

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-14 14:52:41
25ul的体系只需要1ul的酶,加多了也无用。但PCR结果与退火温度与模板有很大的关系。尤其是退火温度要找准,不然就扩增不出所需要的目的条带。
5楼2013-07-14 14:25:08
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