| 查看: 2436 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
lxyyzz木虫 (小有名气)
|
[求助]
求助分子克隆问题——挑不出阳性克隆！ 已有1人参与
|
|
|
分子克隆两个酶切位点是AgeI和XhoI，酶切6h后回收。 载体跑胶，看到的切割条带和预想的一样，8000bp和2000bp，选取8000bp的条带切胶回收。载体和片段回收后也跑过胶，大小位置都是对的。做了好几次都没有阳性克隆，长出的克隆都没有插入片段。 后来我只取了回收后的载体，同样加入连接酶连接转化后，发现板上也长了克隆！大概十几个左右的样子。我很不理解，按照道理说回收后的载体是线性的，并带有两个不同的粘性末端，应该不会再成环啊，为什么还能长的出克隆呢？ 请高人帮忙解释下，给点建议！我是真不知道这种情况该怎么办了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- T载体克隆做不出来，求帮助
已经有24人回复
- 平板能长，挑单克隆却不长啊啊啊啊啊
已经有12人回复
- T-A克隆一直做不出来
已经有28人回复
- 克隆做不出来，求帮助
已经有19人回复
- 请教一下，这是否为假阳性克隆的问题，如果是，该如何提高阳性克隆效率？
已经有20人回复
- 求助 分子克隆转化技术流程
已经有8人回复
- 挑单克隆后，菌液PCR检测所有条带都偏小，目的条带没有出现
已经有9人回复
- 阳性克隆的筛选问题
已经有15人回复
- 分子克隆资料汇总
已经有370人回复
- 分子克隆的经验交流
已经有19人回复
- 菌液PCR是阳性，却提不出来阳性质粒！求助
已经有31人回复
- 分子克隆连接问题！
已经有12人回复
- 求助 双酶切验证阳性克隆的问题
已经有12人回复
- 阳性克隆的鉴定问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】分子克隆
已经有15人回复
- 【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
已经有32人回复
- 【求助/交流】急！克隆快做了一个月了，就是做不出来
已经有24人回复
- 【求助/交流】菌液PCR鉴定阳性克隆时，总出现CK
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助分子克隆问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】有关分子克隆发生突变的疑惑
已经有9人回复
10楼2013-07-11 00:50:09
zhsha1993
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 638
- 帖子: 36
- 在线: 19.3小时
- 虫号: 1613208
- 注册: 2012-02-12
- 性别: GG
- 专业: 细胞周期与调控
2楼2013-07-10 09:59:14
zhsha1993
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 638
- 帖子: 36
- 在线: 19.3小时
- 虫号: 1613208
- 注册: 2012-02-12
- 性别: GG
- 专业: 细胞周期与调控
3楼2013-07-10 10:07:24
4楼2013-07-10 10:09:05