应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分子克隆
161/2返回列表12下一页
查看: 1921  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

fhh819

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分子克隆 已有8人参与

请教高手：1、为什么我在蓝白斑筛选的时候，板子上全是白斑，没有篮班，但是菌液pcr检测的时候，跳了120多个菌，才有2个p出目的条带！
                  2、为什么我的板子上白斑少，并且都在靠近培养皿的边上，连成一片，没有分开！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
俱怀逸兴壮思飞，欲上青天揽明月！
1楼 2011-04-16 21:27:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新人小玥

木虫 (正式写手)
污染了吧~
回复此楼
2楼2011-04-16 22:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3): good 2011-04-17 14:26:50
1：首先楼主蓝白斑筛选的原理清楚吗？你是想要蓝斑，但是没有，说明什么？说明你没有连接上，你应该找你连接的问题而不是一直纠结为什么那么多白斑而无蓝斑。

2：你说白斑少，全在培养皿边上，你的涂布问题吧？
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-04-17 09:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fhh819

银虫 (小有名气)
不对吧，没有连上应该有蓝斑才对呀。
赞一下 回复此楼
俱怀逸兴壮思飞，欲上青天揽明月！
4楼2011-04-17 20:29:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-17 09:24:29:
1：首先楼主蓝白斑筛选的原理清楚吗？你是想要蓝斑，但是没有，说明什么？说明你没有连接上，你应该找你连接的问题而不是一直纠结为什么那么多白斑而无蓝斑。

2：你说白斑少，全在培养皿边上，你的涂布问题吧？

哥们，蓝白斑筛选是要白斑才对！
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2011-04-18 17:11:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-18 17:11:33:
哥们，蓝白斑筛选是要白斑才对！

介个我当然知道，只不过楼主说的太不清楚了。。。我是再一一回答他。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2011-04-18 17:17:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): good 2011-04-18 18:52:36
引用回帖:
Originally posted by fhh819 at 2011-04-16 21:27:45:
请教高手：1、为什么我在蓝白斑筛选的时候，板子上全是白斑，没有篮班，但是菌液pcr检测的时候，跳了120多个菌，才有2个p出目的条带！
                  2、为什么我的板子上白斑少，并且都在靠近培养皿的边上， ...

1.关于只长白斑不长蓝斑问题：最可能的原因是你的显色剂失效了（除非你找了个没有蓝白斑筛选功能的质粒当载体，我想这种低级错误您不会犯的）
2.关于第二个问题：应该是你涂板的问题，没涂均匀
赞一下(2人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-04-18 17:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-18 17:17:32:
介个我当然知道，只不过楼主说的太不清楚了。。。我是再一一回答他。

呵呵
回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
8楼2011-04-18 17:22:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): 欢迎交流 2011-04-18 18:52:51
第一个问题确实应该考虑一下X-gal的问题，再一个你提质粒看一看，因为很多因素影响PCR的结果。第二个问题，你可能没有涂开，也可能是平板上的水滴下来，长成了菌膜。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-04-18 17:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djrhewc

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-04-20 08:31:25
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-18 17:21:55:
1.关于只长白斑不长蓝斑问题：最可能的原因是你的显色剂失效了（除非你找了个没有蓝白斑筛选功能的质粒当载体，我想这种低级错误您不会犯的）
2.关于第二个问题：应该是你涂板的问题，没涂均匀

你好，我也遇到这个问题，做蓝白斑筛选时，板上白斑很多，蓝斑极少，但挑取白斑做菌落PCR，基本上只有几个有目的片段，其余全是空载。然后我做了一个对照，直接将空载体转入感受态细胞涂板，结果，板上还是还是有很多白斑（已经置于冰箱过夜了），这个可否说明X-gal和IPTG可能失效了？
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2011-04-20 08:29:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fhh819 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +9 不知道叫什么！ 2026-03-15 10/500 2026-03-16 10:04 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭