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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好!

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+6, EPI+1): 2011-04-20 13:49:23
首先解决你问题。
其次,想给点建议,希望能明白蓝白斑筛选的原理和注意事项。

1、为什么我在蓝白斑筛选的时候,板子上全是白斑,没有篮班,但是菌液pcr检测的时候,跳了120多个菌,才有2个p出目的条带!
额,第一看自己的载体有蓝白斑筛选标记嘛?第二,看X-GAL和IPTG是否失效。X-GAL是密闭保存的,一般用灰色或者锡纸包装起来,会见光分解故失效。第三,没有蓝斑,可以放在4度冰箱下一段时间,会有显色。但是不以为这有白斑就是有目的条带,还是得做菌液PCR或者菌落PCR。
2、为什么我的板子上白斑少,并且都在靠近培养皿的边上,连成一片,没有分开!
有时候白斑多不见得是成功了,也有可能是假阳性。靠边连成片的最好不要选。因为都不是均一菌体了。考虑如下原因第一,没有涂云。第二,培养时间过了?
原则上,尽量从中间选择单个菌落。这样菌体一致。边上由于涂板时候毕竟会不匀,故尽量弃之。

祝福你早日解决问题!!
最好的年龄是,那一天,终于知道并且坚信自己有多好,不是虚张,不是夸浮,不是众人捧,是内心明明澈澈知道:是的,我就是这么好。
14楼2011-04-20 13:09:21
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