应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分子克隆
41/1返回列表
查看: 1799  |  回复: 15
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fhh819

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分子克隆 已有8人参与

请教高手：1、为什么我在蓝白斑筛选的时候，板子上全是白斑，没有篮班，但是菌液pcr检测的时候，跳了120多个菌，才有2个p出目的条带！
                  2、为什么我的板子上白斑少，并且都在靠近培养皿的边上，连成一片，没有分开！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
俱怀逸兴壮思飞，欲上青天揽明月！
1楼 2011-04-16 21:27:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djrhewc

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-04-20 08:31:25
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-18 17:21:55:
1.关于只长白斑不长蓝斑问题：最可能的原因是你的显色剂失效了（除非你找了个没有蓝白斑筛选功能的质粒当载体，我想这种低级错误您不会犯的）
2.关于第二个问题：应该是你涂板的问题，没涂均匀

你好，我也遇到这个问题，做蓝白斑筛选时，板上白斑很多，蓝斑极少，但挑取白斑做菌落PCR，基本上只有几个有目的片段，其余全是空载。然后我做了一个对照，直接将空载体转入感受态细胞涂板，结果，板上还是还是有很多白斑（已经置于冰箱过夜了），这个可否说明X-gal和IPTG可能失效了？
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2011-04-20 08:29:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djrhewc

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by fhh819 at 2011-04-16 21:27:45:
请教高手：1、为什么我在蓝白斑筛选的时候，板子上全是白斑，没有篮班，但是菌液pcr检测的时候，跳了120多个菌，才有2个p出目的条带！
                  2、为什么我的板子上白斑少，并且都在靠近培养皿的边上， ...

另外，请问楼主，我挑了100个白斑，菌落pcr之后大约只有3,4个有目的条带，质粒，感受态细胞，切胶试剂盒全都换过，还是不能解决这个很简单的实验，快被老师逼疯了...刚做了一个对照,空载体转入感受态细胞,长的斑也大部分为阳性,可能X-gal失效?准备不用蓝白斑直接来挑菌尝试下.
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-04-20 08:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djrhewc

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by beibei9535 at 2011-04-20 13:09:21:
首先解决你问题。
其次，想给点建议，希望能明白蓝白斑筛选的原理和注意事项。

1、为什么我在蓝白斑筛选的时候，板子上全是白斑，没有篮班，但是菌液pcr检测的时候，跳了120多个菌，才有2个p出目的条带！
额 ...

分析的不错,考虑下
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-04-20 14:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fhh819 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭