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monica_1436

木虫 (初入文坛)

[求助] Mix PCR和高保真PCR的条件，如何能调整？

做酶切位点修饰PCR。

求教，MIX PCR时，条带很亮，很清晰，而换了高保真PCR酶，就PCR不出来了，请部这是怎么了，要如何改条件才能PCR出来呀？
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老旺夫了
1楼 2013-06-14 23:46:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
monica_1436(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-15 14:11:23
不同的酶的扩增效率不同，你是否根据酶的特性而改变延伸时间？还有，不同酶对引物浓度、模板浓度的要求也不完全一样，你需要根据酶的说明书混合体系及设置PCR程序。此外，如果模板不纯的话对不同的酶的影响可能不一样，如果不行的话，可以适当增加镁离子浓度或者调整退火温度。
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2楼2013-06-15 03:12:17
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上正解，条件必须重新摸索

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-06-15 04:56:14
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