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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体双酶切后，胶回收的效率极低，胶回收试剂盒正常，双酶切后的电泳图也正常，
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楼1970-01-01 08:00:00
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找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

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走过三月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

胶回收是效率不高的，酶切的时候用大体系，回收最后一步过柱的时候，把好几管的都过到一个柱子里去吧，洗脱液预热一下效果也会好一些
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7楼2013-09-22 13:43:08
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lf6220

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-31 23:29:02
我也遇到过这种情况，我是多做几个酶切管，切胶后，都放到一个纯化柱内，30-50微升的60度的TE缓冲液分两次加入，这样可以提高双酶切后载体的回收量
不知道能否帮到你
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2楼2013-05-31 13:55:08
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实心小白菜

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:29:09
胶回收试剂盒本身就收不回来太多，你可以试试多切点，我一般切60ul的大体系，切5~10ugDNA，然后载体收回来大概能用三四次吧
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有啥不高兴的事儿，说出来大家乐呵乐呵~
3楼2013-05-31 14:04:59
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zhoulubin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-20 20:08:41
胶回收kit回收的片段是有限制的，一般的kit好像是回收大于100bp小于4kb
另外，反应体系加大，载体用量增加，参考kit说明书如何得到更高得率（加热buffer什么的）
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每个年龄都有其最应该做的事，但只有过了那个年龄自己才知道
4楼2013-06-01 14:57:36
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