| 查看: 1465 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
crazymouse66金虫 (正式写手)
|
[求助]
质粒的连接与转化
|
|
| 大家好，我用一株细菌做完菌液PCR后跑琼脂糖电泳，跑完后做切胶回收，用的是试剂盒（试剂盒稍微有点过期了，但是回收完后我测了下DNA浓度和纯度，还是挺好的），然后再和PMD18T质粒进行质粒连接，连接用了一个晚上，是16度和4度交替连接，然后导入大肠杆菌感受态细胞中，最后涂板，用的是AMP氨苄平板，37度培养。但是现在的情况是：我连着做了两次，到最后平板上都没有菌落长出来，请问这大概是什么情况呢？是不是直接做的菌液PCR不能这样做啊？是否哪一步出现了问题，请大家指点一下。谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
301求调剂
已经有3人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有28人回复
-
材料085601调剂
已经有17人回复
-
一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂
已经有23人回复
-
一志愿211，化学310分，本科重点双非，求调剂
已经有17人回复
-
调剂 化学 307
已经有14人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有20人回复
-
296求调剂
已经有13人回复
-
314求调剂
已经有23人回复
-
一志愿沪9，326生物学求相关专业调剂
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因与载体连接转化后涂版长出了菌，提质粒却没有提出来，不知道什么原因？？
已经有17人回复
- 转化后单克隆都一样吗
已经有13人回复
- 双酶切之后，线状质粒的连接问题
已经有13人回复
- 质粒转化与表达
已经有19人回复
- 求助连接转化质粒提取
已经有9人回复
- 质粒构建
已经有13人回复
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 连接转化进大肠杆菌BL21
已经有6人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌转化质粒，出来的不是我要的了，怎么回事？
已经有13人回复
- 【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一
已经有16人回复
- 【求助/交流】pET29a转化E.coli BL21
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于质粒转化，求高手指导！！（附图）
已经有4人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】重组质粒转化
已经有22人回复
- 【求助/交流】质粒pPICZA酶切问题
已经有5人回复
crazymouse66
金虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 3657.7
- 散金: 140
- 红花: 4
- 帖子: 551
- 在线: 112.6小时
- 虫号: 1441792
- 注册: 2011-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2013-05-28 19:51:20
yangtianyuan
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 15.1
- 红花: 2
- 帖子: 169
- 在线: 75小时
- 虫号: 1117680
- 注册: 2010-10-09
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2013-05-28 11:53:33
3楼2013-05-28 16:31:04
crazymouse66
金虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 3657.7
- 散金: 140
- 红花: 4
- 帖子: 551
- 在线: 112.6小时
- 虫号: 1441792
- 注册: 2011-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2013-05-28 19:55:26
