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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
崔永霞(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-16 16:59:31
汗一个, 对不住啊, 第一个问题看走眼了, 没有注意到"大于"....这样的话你要看看产物和基因组DNA的长度比较怎么样, 在这个基因有注释内含子的情况下, 如你的产物等于或者大于基因组DNA大小, 你就需要查污染(基因组DNA污染); 如果你的PCR产物大小是介于1200bp和基因组DNA大小的, 很有可能扩出来的是一个选择性剪切产物. 另外也检查一下引物的特异性, 防止别扩出来的是其他的东西.
至RACE, 你需要用做翻转录后的cDNA作为模板, 不能用已经扩出的那个大于1200bp的PCR, 因为两头的序列已经被设计的引物限制住了. |
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