应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】扩增已知基因的上游序列的方法
101/1返回列表
查看: 2057  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

阿娇

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】扩增已知基因的上游序列的方法

已经用PCR的方法扩增出了一个原核生物的某一基因，想知道其上游的调控基因。但是用常规PCR的方法没有成功。请问各位大侠，还有什么方法可以把基因的上游序列弄出来？siebert PCR可以吗？关于siebert PCR的文献很少。不知道还有没有其他的方法。望大家赐教，不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-15 10:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)
自己顶一下，别沉了。。。
回复此楼
2楼2010-10-15 10:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qwk123

禁虫 (正式写手)
阿娇(金币+2):谢谢交流 2010-10-15 20:03:50
本帖内容被屏蔽
3楼2010-10-15 11:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):感谢参与 2010-10-15 15:31:07
阿娇(金币+3):反向PCR貌似很麻烦，好像实验成功率不高。 2010-10-15 20:04:21
反向吧，一般都能行的啊
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-15 13:59:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ymzfeng

金虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-10-15 17:41:54
阿娇(金币+5):谢谢交流，我查下着方面的资料，非常感谢！ 2010-10-15 20:05:03
RACE-PCR和Tail-PCR
可以考虑下的
还有反向PCR
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-15 14:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
阿娇(金币+3):谢谢交流 2010-10-15 20:05:15
做个反向pcr 就拿到了
赞一下 回复此楼
6楼2010-10-15 14:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ymzfeng at 2010-10-15 14:13:07:
RACE-PCR和Tail-PCR
可以考虑下的
还有反向PCR

原核生物可以做RACE-PCR么？貌似是真核生物有polyA尾的才可以做吧？
赞一下 回复此楼
7楼2010-10-15 21:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)
阿娇(金币+4):设计引物和接头难度确实很大。谢谢交流！ 2010-10-16 14:41:37
有个办法麻烦点但一定能扩出来，用你已得到的基因序列设计一条下游引物，上游设置一系列接头，用相应的内切酶酶切基因组DNA，与接头连接。设计接头特异性引物与基因特异性引物组对进行PCR。产物测序。可以多设几种接头，逐个尝试。
赞一下 回复此楼
8楼2010-10-15 21:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulu1986

捐助贵宾 (小有名气)
阿娇(金币+2):谢谢交流！方法都比较麻烦啊。呵呵 2010-10-16 14:42:26
TAIL-PCR，非常有效！
赞一下 回复此楼
Nothingisimpossible!
9楼2010-10-16 07:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulu1986

捐助贵宾 (小有名气)
但需要多个巢式引物和随机兼并引物，并且需要多次改变条件，较麻烦！
赞一下 回复此楼
Nothingisimpossible!
10楼2010-10-16 07:03:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 阿娇 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303，338分，求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭