应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 半定量PCR技术
91/1返回列表
查看: 1903  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

9号逐梦客

新虫 (正式写手)

[求助] 半定量PCR技术

大家好，关于半定量PCR的一点小知识，请教一下，一个是我通过调整PCR前的cDNA的量来使内参一致，然后跑胶；还有一种就是PCR前cDNA上样量一样，跑胶的时候通过跑胶的上样量调整内参的亮度来做，不知道这样是否正确科学。大家指导一下。这两个方法哪个正确，还是都正确？小弟谢过。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
为了梦想不断坚持在路上
1楼 2013-05-02 22:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-15 03:19:56
第二种应该不正确吧，多主观啊。第一种的话，不是每次cdna都是等同的吗，额。。。。。你没有内参基因吗 跟自身的内参基因比就行了啊
赞一下 回复此楼
Ecological Genomics；the scientific walking hormone
2楼2013-05-03 09:34:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

9号逐梦客

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by czfscf at 2013-05-03 09:34:59
第二种应该不正确吧，多主观啊。第一种的话，不是每次cdna都是等同的吗，额。。。。。你没有内参基因吗 跟自身的内参基因比就行了啊

如果按照第一种做，调整之后一般是cDNA不一样的，我有内参的啊，但是要通过调整把它们调一样才可以做啊。
赞一下 回复此楼
为了梦想不断坚持在路上
3楼2013-05-03 13:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czfscf

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 9号逐梦客 at 2013-05-03 13:38:55
如果按照第一种做，调整之后一般是cDNA不一样的，我有内参的啊，但是要通过调整把它们调一样才可以做啊。...

要一样么 每个样都是把目的基因去掉内参之后的值，干吗必须要内参一样？不懂，我也质疑一下。你用的2代尔塔代尔塔法算的吗
赞一下 回复此楼
Ecological Genomics；the scientific walking hormone
4楼2013-05-03 15:13:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivysmile

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-15 03:20:06
第一个可靠
内参基因循环数不应太多的，达到了平台期 体现不出来了
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-14 11:17:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

9号逐梦客

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ivysmile at 2013-05-14 11:17:03
第一个可靠
内参基因循环数不应太多的，达到了平台期 体现不出来了

谢谢啊，做之前，循环数我都有调整过的，不会达到平台期。
赞一下 回复此楼
为了梦想不断坚持在路上
6楼2013-05-14 12:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wodezxn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
9号逐梦客(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-15 03:20:39
gyesang: 回帖置顶 2013-05-15 03:20:40
有个好方法，同一个体系同时扩增目的基因和内参！
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-14 16:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

9号逐梦客

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wodezxn at 2013-05-14 16:50:11
有个好方法，同一个体系同时扩增目的基因和内参！

呵呵，这个建议不错，谢谢啊，但是这样还需要重新设计引物，还需要验证引物的特异性，不过也不是不可以呢。
赞一下(1人) 回复此楼
为了梦想不断坚持在路上
8楼2013-05-14 18:42:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wodezxn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 9号逐梦客 at 2013-05-14 18:42:58
呵呵，这个建议不错，谢谢啊，但是这样还需要重新设计引物，还需要验证引物的特异性，不过也不是不可以呢。...

内参和目的基因的退火温度本来就应该是一致的，保证同样的体系和扩增效率
赞一下 回复此楼
9楼2013-05-16 11:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 9号逐梦客 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +3 vv迷 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:05 by f19980501
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 269专硕求调剂 +5 金恩贝 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:37 by zhyzzh
[考研] 一志愿211，0703化学310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-21 22:21 by peike
[考研] 354求调剂 +6 Tyoumou 2026-03-18 9/450 2026-03-21 20:47 by lbsjt
[考研] 化学工程321分求调剂 +18 大米饭！ 2026-03-15 22/1100 2026-03-21 20:20 by HH领袖
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸！ 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭